添加時(shí)間:2022-09-02 12:28 瀏覽次數(shù): 來(lái)源:移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室
PCR檢測(cè)因其高靈敏度、快速、操作方便等優(yōu)勢(shì)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用,不過(guò)正是由于它靈敏度極高,極微量的污染源都有可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性,移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室如何避免以及處理實(shí)驗(yàn)室污染?
移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室污染分類:樣本間交叉污染,主要是在采(?。拥倪^(guò)程中,由于取樣工具之間的交叉造成污染;或者在核酸提取的過(guò)程中,由于移液器、離心管等使用不當(dāng)導(dǎo)致的污染。PCR試劑的污染,主要是在PCR試劑配制過(guò)程中,由于移液器、容器、陰性對(duì)照及其它試劑被核酸模板或陽(yáng)性對(duì)照污染??寺≠|(zhì)粒的污染,在實(shí)驗(yàn)室操作中經(jīng)常會(huì)用到陽(yáng)性參考品,這些陽(yáng)性參考品大多數(shù)是由某些克隆質(zhì)粒制作而成,克隆質(zhì)粒在單位容積內(nèi)濃度高,不小心使用極易造成污染。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染.這是PCR反應(yīng)中最主要最常見(jiàn)的污染問(wèn)題。因?yàn)镻CR產(chǎn)物拷貝量大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測(cè)數(shù)個(gè)拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,就可造成假陽(yáng)性結(jié)果。還有一種容易忽視,最可能造成PCR產(chǎn)物污染的形式是氣溶膠污染,在空氣與液體面摩擦?xí)r就可形成氣溶膠,據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含4.8萬(wàn)拷貝,因而由其造成的污染是一個(gè)值得特別重視的問(wèn)題。
移動(dòng)PCR實(shí)驗(yàn)室消除污染的操作步驟:購(gòu)買噴壺(能夠噴出霧狀水汽的即可);有效氯消毒片,根據(jù)要求配制不同濃度的消毒液,或者購(gòu)買成品次氯酸鈉消毒液配制合適濃度消毒水;核酸氣溶膠污染清除劑。無(wú)紡布/無(wú)塵紙等。
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